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2021-08-12
RNA免疫共沉淀(RNAimmunoprecipitation,RIP)是一種基于抗體的技術,用于定位體內的RNA-蛋白質相互作用。將所關注的RNA結合蛋白(RBP)與其結合的RNA一起進行免疫沉淀,鑒定結合轉錄RNA(mRNA、非編碼RNA或病毒RNA),可以通過實時PCR、微陣列或測序檢測。表觀遺傳學和RNA生物學領域對不同RNA作用和功能的關注大大增加。據觀察,RNA的功能遠不止轉錄和后續(xù)的翻譯。例如,RNA-蛋白質相互作用能夠調控mRNA和非編碼RNA的功能。對RNA...2021-08-02
1、樣本準備過程中防止蛋白質降解和保留翻譯后修飾樣本準備過程中,細胞會釋放蛋白酶和/或去磷酸化酶,為了減少這些酶的活性,處理樣本的過程應在冰上進行,并預先冷卻所有緩沖液,并且建議用含蛋白酶和磷酸酶抑制劑的裂解緩沖液。2、磷酸化特異性抗體的選擇選擇磷酸化特異性抗體時,選擇所要檢測位點的磷酸化抗體至關重要。磷酸化都會使蛋白質的分子量增加80Da,檢查抗體是否檢測到磷酸化靶蛋白的分子量正確的條帶也很重要。3、誘導磷酸化課題設計可能需要在收獲前刺激細胞,以確保蛋白質被磷酸化。例如,在...2021-08-02
蛋白轉印的方法蛋白轉印可選擇傳統(tǒng)濕轉、半干轉或快速半干轉方法。濕轉系統(tǒng):適用于大多數各種分子量的常規(guī)蛋白轉印。轉印過程中凝膠和膜被浸入充滿轉印緩沖液的槽中。半干轉系統(tǒng):凝膠和膜被夾在預先潤濕緩沖液的濾紙之間,濾紙與平板電極直接接觸。半干轉系統(tǒng)的安裝使用比濕轉簡單??焖俎D印系統(tǒng):快速轉印系統(tǒng)是最近發(fā)展出來的技術,使用專用設備、專用濾紙及專用緩沖液來快速有效地轉印蛋白。通常濾紙和濕潤的膜預先放在一次性包裝中,簡化了轉印“三明治”的組裝。轉印緩沖液轉印緩沖液包含強導電性化學緩沖試劑...2021-07-30
中山大學藥學院于7月27日發(fā)布通報,該院2021年7月27日發(fā)生一起實驗安全事故,實驗=室在清理通風柜時發(fā)現之前畢業(yè)生遺留在燒瓶內的未知白色固體,一博士研究生用水沖洗時發(fā)生炸裂,炸裂產生的玻璃碎片刺破該生手臂動脈血管,送醫(yī)救治傷情得到控制,無生命危險。與實驗室負責老師溝通分析,導致炸裂的未知白色固體中可能含有氫化鈉或氫化鈣,遇水發(fā)生劇烈反應而炸裂。實驗室的瓶瓶罐罐清洗是科研工作者最日常的工作,但是,如果你并不確定瓶內裝的是什么東西,千萬不要隨意就拿去清洗!有些化學品遇水會發(fā)生...